動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)工程

第一章動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的歷史和發(fā)展1
第一節(jié)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展歷史1
第二節(jié)通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)得到的產(chǎn)品2
一、近年來美國(guó)食品和藥品管理局（FDA）批準(zhǔn)的產(chǎn)品3
二、近來報(bào)道的工藝6
三、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)過程7
四、貼壁細(xì)胞培養(yǎng)過程8
五、懸浮和貼壁細(xì)胞培養(yǎng)過程的共同 問題9
第三節(jié)哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)9
參考文獻(xiàn)11
第二章動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)的生物學(xué)15
第一節(jié)細(xì)胞分類和細(xì)胞系16
一、細(xì)胞的貼壁依賴性16
二、細(xì)胞培養(yǎng)物17
三、常用細(xì)胞系18
第二節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)和死亡20
一、細(xì)胞的生長(zhǎng)和死亡20
二、細(xì)胞周期調(diào)控21
第三節(jié)哺乳動(dòng)物外源蛋白質(zhì)表達(dá)宿主細(xì)胞改造25
一、實(shí)現(xiàn)無(wú)血清、無(wú)蛋白培養(yǎng)26
二、改變細(xì)胞的能量代謝途徑26
三、改進(jìn)細(xì)胞貼壁性27
四、增強(qiáng)抗細(xì)胞凋亡活性28
五、控制細(xì)胞增殖速率28
六、改善重組蛋白質(zhì)糖基化28
參考文獻(xiàn)29
第三章培養(yǎng)基和添加劑31
第一節(jié)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)34
一、pH34
二、緩沖34
三、滲透壓34
四、溫度34
五、黏度34
六、表面張力和泡沫34
第二節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)基的基本組成35
一、水35
二、低分子量營(yíng)養(yǎng)物35
三、非營(yíng)養(yǎng)性物質(zhì)38
第三節(jié)血清39
一、蛋白質(zhì)40
二、多肽40
三、激素40
四、代謝物和營(yíng)養(yǎng)物40
五、無(wú)機(jī)物40
六、抑制劑40
第四節(jié)無(wú)血清和無(wú)蛋白培養(yǎng)基41
一、無(wú)血清培養(yǎng)基41
二、無(wú)血清培養(yǎng)基的常用添加成分41
三、無(wú)蛋白培養(yǎng)基45
四、利用無(wú)血清無(wú)蛋白培養(yǎng)基培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的方法和工藝45
第五節(jié)工業(yè)規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基46
一、低血清培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)基46
二、對(duì)貼壁依賴性細(xì)胞系懸浮培養(yǎng)的培養(yǎng)基設(shè)計(jì)48
三、適合于高密度培養(yǎng)的低成本培養(yǎng)基設(shè)計(jì)48
參考文獻(xiàn)49
第四章細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法52
第一節(jié)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件和
常規(guī)操作52
一、細(xì)胞培養(yǎng)基本條件52
二、細(xì)胞的消化55
三、細(xì)胞計(jì)數(shù)55
四、動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存56
五、細(xì)胞培養(yǎng)的污染和控制58
第二節(jié)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)工藝62
一、貼壁培養(yǎng)63
二、懸浮培養(yǎng)70
三、固定化培養(yǎng)71
參考文獻(xiàn)71
第五章細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器73
第一節(jié)攪拌式生物反應(yīng)器74
一、籠式通氣攪拌生物反應(yīng)器74
二、傳遞特性分析75
三、雙層籠式通氣攪拌器生物反應(yīng)器（CellCul20）78
四、離心式攪拌器細(xì)胞培養(yǎng)
反應(yīng)器（CellCul50）79
第二節(jié)氣升式細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器81
一、氣升式生物反應(yīng)器構(gòu)型及原理81
二、混合和傳質(zhì)83
三、氣升式生物反應(yīng)器的應(yīng)用84
第三節(jié)固定床和流化床生物反應(yīng)器87
一、流化床生物反應(yīng)器87
二、陶質(zhì)矩形通道蜂窩狀生物反應(yīng)器88
三、固定床生物反應(yīng)器88
第四節(jié)膜式生物反應(yīng)器89
一、中空纖維生物反應(yīng)器及其原理89
二、中空纖維生物反應(yīng)器的局限性
及其優(yōu)缺點(diǎn)90
三、中空纖維生物反應(yīng)器在動(dòng)物細(xì)胞及組織培養(yǎng)中的應(yīng)用91
第五節(jié)生物反應(yīng)器的檢測(cè)與控制92
參考文獻(xiàn)94
第六章細(xì)胞的損傷和死亡97
第一節(jié)細(xì)胞的損傷和保護(hù)97
一、水力相關(guān)的細(xì)胞損傷97
二、氣泡相關(guān)的細(xì)胞損傷103
三、細(xì)胞的保護(hù)107
第二節(jié)細(xì)胞凋亡109
一、細(xì)胞壞死和細(xì)胞凋亡的特征110
二、細(xì)胞凋亡的檢測(cè)方法111
三、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中的細(xì)胞壞死和細(xì)胞凋亡113
四、與細(xì)胞凋亡過程有關(guān)的基因114
五、抑制細(xì)胞凋亡的策略115
參考文獻(xiàn)118
第七章細(xì)胞培養(yǎng)模式120
第一節(jié)分批和換液培養(yǎng)121
一、分批培養(yǎng)121
二、換液培養(yǎng)122
第二節(jié)連續(xù)培養(yǎng)123
第三節(jié)灌注培養(yǎng)126
一、灌注培養(yǎng)過程的特性126
二、灌注培養(yǎng)系統(tǒng)的控制策略127
三、灌注培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)129
第四節(jié)流加培養(yǎng)130
一、流加培養(yǎng)基130
二、減少副產(chǎn)物的積累131
三、流加培養(yǎng)過程的檢測(cè)和控制131
四、流加培養(yǎng)過程中的動(dòng)力學(xué)133
五、流加培養(yǎng)的舉例134
六、與其他操作模式的比較141
第五節(jié)細(xì)胞截留方式及裝置142
一、微載體沉降系統(tǒng)142
二、傾斜式沉降系統(tǒng)143
三、旋轉(zhuǎn)過濾式細(xì)胞截留系統(tǒng)144
四、中空纖維細(xì)胞截留系統(tǒng)146
五、超聲波細(xì)胞截留系統(tǒng)147
六、離心式細(xì)胞截留系統(tǒng)148
參考文獻(xiàn)149
第八章細(xì)胞培養(yǎng)過程中的代謝和調(diào)控153
第一節(jié)糖代謝153
一、糖酵解153
二、三羧酸循環(huán)155
三、磷酸戊糖途徑157
第二節(jié)氨基酸代謝158
一、氨基酸的脫氨基作用158
二、α酮酸的代謝159
三、谷氨酰胺的代謝159
第三節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)中的代謝調(diào)控160
一、培養(yǎng)基的優(yōu)化160
二、葡萄糖代謝和谷氨酰胺代謝
的相互影響163
第四節(jié)代謝副產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響164
一、乳酸165
二、氨173
三、丙氨酸183
第五節(jié)代謝工程185
一、哺乳動(dòng)物細(xì)胞的糖基化加工186
二、昆蟲細(xì)胞中N糖鏈加工的缺陷187
三、代謝工程改善昆蟲細(xì)胞的糖基化188
參考文獻(xiàn)191
第九章組織工程193
第一節(jié)體外重建人體組織的培養(yǎng)193
一、種子細(xì)胞194
二、細(xì)胞培養(yǎng)方式194
三、細(xì)胞分化問題197
四、細(xì)胞特性的檢測(cè)199
五、質(zhì)量控制199
第二節(jié)組織工程的研究進(jìn)展200
一、人工皮膚200
二、造血組織200
三、人工肝臟200
四、胰組織201
五、軟骨組織202
參考文獻(xiàn)203
第十章動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中蛋白質(zhì)生產(chǎn)的調(diào)控及品質(zhì)控制205
第一節(jié)蛋白質(zhì)生產(chǎn)調(diào)控的策略205
一、外源添加物提高蛋白質(zhì)的生產(chǎn)能力205
二、細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境對(duì)蛋白質(zhì)生產(chǎn)的影響224
第二節(jié)哺乳動(dòng)物細(xì)胞生產(chǎn)的重組糖蛋白的異質(zhì)性231
一、蛋白質(zhì)糖基化的生物學(xué)作用231
二、培養(yǎng)基成分對(duì)蛋白質(zhì)糖基化的影響233
三、代謝產(chǎn)物對(duì)蛋白質(zhì)糖基化的影響235
四、添加寡糖前體對(duì)糖基化的影響237
五、丁酸鈉濃度對(duì)EPO糖基化的影響238
參考文獻(xiàn)239
第十一章動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的生產(chǎn)工藝管理244
第一節(jié)細(xì)胞庫(kù)244
第二節(jié)GMP規(guī)程245
一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)藥物的生產(chǎn)特點(diǎn)246
二、硬件設(shè)施247
第三節(jié)生產(chǎn)過程的檢驗(yàn)249
一、細(xì)胞庫(kù)檢驗(yàn)249
二、培養(yǎng)物和產(chǎn)物檢測(cè)249
三、質(zhì)量控制檢驗(yàn)250
參考文獻(xiàn)253