第一篇 基礎酶學
第一章 酶學與酶工程 2
第一節(jié) 酶工程概述 2
一、酶與酶工程 2
二、酶工程簡介 3
第二節(jié) 酶的分類、組成、結構特點和作用機制 4
一、酶的分類 4
二、酶的組成和結構特點 5
三、酶的作用機制 6
第三節(jié) 酶催化劑的特點 11
一、高效性 11
二、專一性 11
三、可調節(jié)性 13
第四節(jié) 影響酶活性的因素 14
一、酶活測定方式 14
二、酶聯測定法 15
三、酶反應速率 15
四、底物濃度 16
五、酶濃度 16
六、溫度 16
七、pH 16
第五節(jié) 酶反應動力學和抑制作用 17
一、米-曼氏模式 17
二、Lineweaver-Burk作圖 18
三、酶的抑制作用 18
第六節(jié) 酶的制備 20
一、酶的來源 20
二、蛋白質表達常見問題及解決方式 21
第七節(jié) 蛋白質、酶和重組蛋白的分離純化 26
一、蛋白質純化的一般考慮 26
二、蛋白質的粗分離 28
三、蛋白質的大規(guī)模分離純化 32
總結與展望 36
參考文獻 36
第二篇 實踐酶學
第二章 非水酶學 40
第一節(jié) 概述 40
第二節(jié) 傳統(tǒng)非水酶學中的反應介質 40
一、水-有機溶劑單相系統(tǒng) 40
二、水-有機溶劑兩相系統(tǒng) 41
三、含有表面活性劑的乳液或微乳液系統(tǒng) 41
四、微水有機溶劑單相系統(tǒng) 42
五、無溶劑或微溶劑反應系統(tǒng) 42
六、氣相反應介質 43
第三節(jié) 非水介質中酶的結構與性質 43
一、非水介質中酶的結構 43
二、非水介質中的酶學性質 46
第四節(jié) 影響非水介質中酶催化的因素以及調控策略 49
一、有機溶劑 49
二、水 51
三、添加劑 55
四、生物印跡 55
五、化學修飾 55
六、固定化酶 56
七、反應溫度 57
八、pH 和離子強度 57
第五節(jié) 非水介質中酶催化的應用 57
一、酯的合成 57
二、肽的合成 59
三、高分子的合成與改性 60
四、光學活性化合物的制備 63
第六節(jié) 非水酶學的最新研究技術 64
一、非水酶學中的新型反應介質 64
二、非水酶學中的新技術 76
三、尋找和改造耐有機溶劑的酶 83
總結與展望 85
參考文獻 85
第三章 酶的化學修飾 91
第一節(jié) 化學修飾的方法學 91
一、修飾反應專一性的控制 91
二、修飾程度和修飾部位的測定 93
三、化學修飾結果 94