烯硫醚動態(tài)共價鍵及其化學生物學應用

第1章  緒論    001
1.1  引言 001
1.2  動態(tài)組合化學 001
1.2.1  超分子化學 001
1.2.2  動態(tài)共價化學 002
1.2.3  動態(tài)共價鍵 002
1.3  動態(tài)共價鍵的應用 005
1.3.1  動態(tài)共價鍵在生物活性物質及生命機制傳感方面的應用 005
1.3.2  動態(tài)共價鍵作為連接鍵在藥物遞送及控釋方面的應用 010
參考文獻 019
第2章  烯硫醚動態(tài)共價鍵氧化還原響應性能研究及調控    024
2.1  烯硫醚動態(tài)共價鍵體系模型的構建 025
2.1.1  主要試劑 025
2.1.2  實驗儀器 025
2.1.3  研究思路及合成路線 026
2.1.4  烯硫醚動態(tài)共價鍵模型體系的合成 026
2.2  烯硫醚動態(tài)共價鍵體系氧化還原響應性質研究及能力調控 031
2.2.1  儲備溶液配制說明及實驗條件 031
2.2.2  C-CN2COOMe的GSH取代動力學 031
2.2.3  iPrS-CN2COOMe的GSH取代動力學 032
2.2.4  Fmoc-bMe-S-Cys-CN2COOMe的GSH取代動力學 034
2.2.5  烯硫醚動態(tài)共價鍵的DTT還原 035
2.3  總結與展望 035
參考文獻 037
第3章  烯硫醚動態(tài)共價鍵在蛋白質標記中的應用    038
3.1  基于烯硫醚動態(tài)共價鍵的內源性單雙巰基蛋白同步可視化傳感 039
3.1.1  引言 039
3.1.2  實驗試劑與儀器 040
3.1.3  研究思路及合成路線 041
3.1.4  探針設計與合成 042
3.1.5  實驗條件及儲備溶液配制說明 044
3.1.6  結果與討論 045
3.1.7  總結與展望 053
3.2  噬菌體展示熒光環(huán)肽探針文庫構建及蛋白質分析研究 054
3.2.1  引言 054
3.2.2  熒光環(huán)肽文庫設計思路及合成路線 055
3.2.3  應答模塊合成路線 059
3.2.4  噬菌體展示文庫探針合成 059
3.2.5  探針響應及修飾性能考察 063
3.2.6  噬菌體展示多肽文庫滴度測定 065
3.2.7  噬菌體展示熒光環(huán)肽文庫對靶標蛋白Biotin-Keap1的篩選 065
3.2.8  單克隆測序結果 066
3.2.9  多肽的合成與環(huán)化 066
3.2.10  環(huán)肽分子對靶標蛋白的熒光檢測 067
3.2.11  總結與展望 068
3.3  基于新型烯硫醚動態(tài)共價鍵的細胞膜表面巰基-二硫鍵交換機制研究 068
3.3.1  引言 068
3.3.2  實驗試劑與儀器 070
3.3.3  研究思路及合成路線 070
3.3.4  探針合成 072
3.3.5  谷胱甘肽取代動力學 076
3.3.6  結果與討論 076
3.3.7  總結與展望 084
3.4  基于烯硫醚動態(tài)共價鍵探索細胞膜表面巰基受體介導增強跨膜運輸機制 085
3.4.1  引言 085
3.4.2  烯硫醚 087
3.4.3  烯硫醚動態(tài)探針體系合成 092
3.4.4  總結與展望 097
參考文獻 100
第4章  烯硫醚動態(tài)共價鍵在藥物遞送領域的應用探究    104
4.1  基于烯硫醚動態(tài)共價連接鍵的非內化藥物遞送體系構建 104
4.1.1  引言 104
4.1.2  研究思路及合成路線 105
4.1.3  烯硫醚非內化藥物遞送體系合成 107
4.1.4  聚合物POEGMA分子量及聚合度計算 113
4.1.5  給藥體系修飾效率表征 113
4.1.6  S-C及S-S猝滅體系的GSH還原動力學 113
4.1.7  烯硫醚載藥系統(tǒng)給藥內化機制研究 115
4.1.8  總結與展望 116
4.2  膜表面巰基受體-烯硫醚動態(tài)共價鍵交換反應介導跨膜遞送體系構建 116
4.2.1  引言 116
4.2.2  設計思路及研究內容 122
4.2.3  遞送體系合成 123
4.2.4  總結與展望 128
參考文獻 129
第5章  烯硫醚動態(tài)共價鍵在多肽環(huán)化領域的應用探究    132
5.1  引言 132
5.1.1  蛋白質-蛋白質相互作用 132
5.1.2  多肽藥物 133
5.1.3  環(huán)肽 134
5.1.4  多肽位點特異性反應 136
5.2  研究思路及意義 145
5.3  二元環(huán)肽噬菌體文庫構建及靶標篩選流程 146
5.3.1  實驗材料及試劑 146
5.3.2  實驗儀器 146
5.3.3  溶液配制 147
5.3.4  實驗方法 148
5.4  基于烯硫醚鍵的二元環(huán)肽配體篩選評價 153
5.4.1  靶標蛋白生物素化磁珠捕獲實驗 153
5.4.2  噬菌體展示多肽文庫滴度測定 154
5.4.3  噬菌體展示多肽文庫對生物素化的靶標蛋白Biotin-mCNα篩選 154
5.4.4  單克隆測序結果 155
5.4.5  高通量測序結果 155
5.4.6  多肽的合成與環(huán)化 156
5.4.7  活性測試 156
5.5  總結與展望 157
參考文獻 157