基因工程：動物細(xì)胞制藥關(guān)鍵技術(shù)

定　價：￥128.00

作　者：	王天云、賈巖龍、楊赟等著
出版社：	化學(xué)工業(yè)出版社
叢編項(xiàng)：
標(biāo)　簽：	暫缺

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ISBN：	9787122433237	出版時間：	2024-01-01	包裝：	平裝
開本：	16開	頁數(shù)：		字?jǐn)?shù)：

內(nèi)容簡介

　　《基因工程——動物細(xì)胞制藥關(guān)鍵技術(shù)》圍繞動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)重組蛋白質(zhì)藥物的關(guān)鍵技術(shù)，從動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞載體、目的基因?qū)搿⒅亟M穩(wěn)定細(xì)胞株篩選和評估、重組蛋白分離純化、重組蛋白藥物鑒定與分析、重組蛋白藥物新技術(shù)等方面，詳細(xì)介紹了該領(lǐng)域的關(guān)鍵技術(shù)及新技術(shù)。本書涵蓋了動物細(xì)胞制藥基因工程近年來的最新的關(guān)鍵技術(shù)及相關(guān)進(jìn)展，可作為從事生物制藥、基因工程等領(lǐng)域工作的科研人員、專業(yè)技術(shù)人員及相關(guān)專業(yè)的教師和學(xué)生的參考用書。

作者簡介

　　王天云，博士，教授，博士生導(dǎo)師。新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院“太行學(xué)者”特聘教授。河南省重組藥物蛋白表達(dá)系統(tǒng)國際聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室及生物創(chuàng)新藥物工程技術(shù)研究中心主任，中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)會理事，河南省生物化學(xué)與分子生物學(xué)會理事長，“長江學(xué)者”，國家科技進(jìn)步獎評審專家。主持國家自然科學(xué)基金4項(xiàng)，省重大科技專項(xiàng)1項(xiàng)，創(chuàng)新杰出人才項(xiàng)目1項(xiàng)；參與國家“863”課題、國家重大科技專項(xiàng)各1項(xiàng)。獲省科技進(jìn)步二等獎2項(xiàng)、三等獎1項(xiàng)。申請國家發(fā)明專利35項(xiàng)，已授權(quán)16項(xiàng)。發(fā)表研究論文86篇，其中SCI收錄53篇，被引1076次。長期從事哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的研究，建立了國際水平的哺乳細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，包括高效表達(dá)載體、細(xì)胞系及培養(yǎng)基。已實(shí)現(xiàn)技術(shù)轉(zhuǎn)移2項(xiàng)，專利轉(zhuǎn)化8項(xiàng)。

圖書目錄

第一章動物細(xì)胞培養(yǎng) 001
第一節(jié) 動物細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)知識 002
一、基本概念 002
二、動物細(xì)胞培養(yǎng)條件 003
三、動物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室 004
四、無菌技術(shù) 006
第二節(jié) 動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 007
一、動物細(xì)胞凍存與復(fù)蘇 007
二、動物細(xì)胞傳代 009
三、動物細(xì)胞懸浮馴化及無血清培養(yǎng) 011
四、動物細(xì)胞分批培養(yǎng) 015
五、動物細(xì)胞補(bǔ)料分批培養(yǎng) 016
六、動物細(xì)胞灌流技術(shù)培養(yǎng) 022
第三節(jié) 動物細(xì)胞生物特性分析 025
一、動物細(xì)胞生長曲線和倍增時間分析 025
二、動物細(xì)胞增殖測定 028
三、動物細(xì)胞凋亡檢測 031
四、動物細(xì)胞周期檢測 036
參考文獻(xiàn) 038
第二章動物細(xì)胞載體 041
第一節(jié) 質(zhì)粒載體構(gòu)建 042
一、目的基因獲取 042
二、限制性內(nèi)切酶酶切 046
三、目的片段和載體連接 048
四、重組子轉(zhuǎn)化 050
五、重組載體篩選 052
六、重組載體鑒定 052
第二節(jié) 病毒載體構(gòu)建 056
一、桿狀病毒表達(dá)載體 056
二、慢病毒載體 057
三、腺病毒載體 059
四、逆轉(zhuǎn)錄病毒載體 060
參考文獻(xiàn) 061
第三章目的基因?qū)? 065
第一節(jié) 動物細(xì)胞轉(zhuǎn)染 066
一、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染 066
二、聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染 067
三、電穿孔轉(zhuǎn)染 068
四、影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染的因素 069
第二節(jié) 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率檢測 070
一、流式細(xì)胞儀檢測 071
二、熒光顯微鏡檢測 071
參考文獻(xiàn) 072
第四章重組穩(wěn)定細(xì)胞株篩選和評估 075
第一節(jié) 重組穩(wěn)定細(xì)胞池篩選 076
一、常用的抗生素篩選標(biāo)記 076
二、遺傳霉素篩選 078
三、DHFR篩選 079
四、GS篩選 080
第二節(jié) 重組單克隆細(xì)胞株分離 081
一、有限稀釋法 081
二、流式細(xì)胞熒光分選技術(shù) 082
三、ClonePix 083
四、克隆環(huán)法 084
五、其他篩選方法 085
第三節(jié) 重組穩(wěn)定細(xì)胞系評估 086
一、細(xì)胞污染檢測 086
二、細(xì)胞系鑒定 087
三、外源基因整合分析 089
四、重組蛋白表達(dá)分析 098
參考文獻(xiàn) 101
第五章重組蛋白分離純化 103
第一節(jié) 重組蛋白純化策略及設(shè)備 104
一、重組蛋白純化策略 104
二、重組蛋白純化設(shè)備 107
第二節(jié) 重組蛋白沉淀和膜分離技術(shù) 116
一、蛋白質(zhì)沉淀法 117
二、膜分離技術(shù) 118
第三節(jié) 重組蛋白分離色譜技術(shù) 119
一、親和色譜法 120
二、疏水色譜法 122
三、凝膠過濾色譜法 124
四、離子交換色譜法 126
五、反相色譜法 129
參考文獻(xiàn) 131
第六章重組蛋白藥物鑒定與分析 135
第一節(jié) 蛋白質(zhì)理化特性 136
一、分子量測定 136
二、等電點(diǎn)與電荷異質(zhì)性分析 141
三、肽圖分析 144
四、氨基酸組成分析 145
五、N端氨基酸測序 150
六、C端氨基酸測序 152
七、二硫鍵分析 153
八、高級結(jié)構(gòu)分析 155
第二節(jié) 蛋白質(zhì)含量分析 159
一、凱氏定氮法 159
二、Lowry法 161
三、BCA法 162
四、Bradford法 164
五、紫外吸收法 166
六、高效液相色譜法 166
第三節(jié) 蛋白質(zhì)純度分析 168
一、宿主細(xì)胞蛋白殘留分析 168
二、宿主細(xì)胞DNA殘留分析 170
三、殘留抗生素檢測 172
四、其他成分檢測 173
第四節(jié) 糖基化修飾分析 181
一、分離富集親和技術(shù) 182
二、糖蛋白鑒定/糖基化位點(diǎn)的確定方法 187
三、糖鏈結(jié)構(gòu)分析 189
第五節(jié) 生物學(xué)活性測定 206
一、體外法評估 207
二、體內(nèi)法評估 211
第六節(jié) 免疫化學(xué)特性分析 213
一、親和力測定 213
二、抗原結(jié)合表位測定 217
參考文獻(xiàn) 219
第七章重組蛋白藥物新技術(shù) 223
第一節(jié) 人工智能與蛋白藥物設(shè)計 224
一、核苷酸及蛋白質(zhì)相關(guān)數(shù)據(jù)庫 224
二、基因信息分析及密碼子優(yōu)化 226
三、蛋白質(zhì)信息分析及結(jié)構(gòu)預(yù)測 241
四、人工智能設(shè)計 255
第二節(jié) miRNA篩選與應(yīng)用 269
一、miRNA篩選 269
二、miRNA應(yīng)用 273
第三節(jié) 基因編輯技術(shù) 279
一、動物細(xì)胞CRISPR基因敲除 279
二、動物細(xì)胞基因敲入 289
第四節(jié) 表觀遺傳學(xué)技術(shù) 299
一、DNA甲基化分析 299
二、組蛋白修飾分析 305
三、非編碼RNA分析 314
第五節(jié) DNA與蛋白質(zhì)相互作用分析 323
一、凝膠遷移實(shí)驗(yàn) 323
二、DNaseⅠ足跡實(shí)驗(yàn) 330
三、酵母單雜交系統(tǒng) 337
四、染色質(zhì)免疫沉淀 351
五、噬菌體展示技術(shù)（DNA與蛋白質(zhì)相互作用） 354
參考文獻(xiàn) 356
附錄1 常用緩沖液及試劑的配制 363
附錄2 中英文詞匯表 369