硒在大米中的組學(xué)解析及其功能調(diào)控

第1章  硒的營(yíng)養(yǎng)與富硒產(chǎn)品 1
1.1  硒的概述 1
1.1.1  硒的研究發(fā)展史 1
1.1.2  硒的存在形式與分布 1
1.2  硒的金屬組學(xué)研究進(jìn)展 2
1.2.1  金屬組學(xué) 2
1.2.2  金屬組學(xué)的研究方向、內(nèi)容與方法 3
1.2.3  硒的形態(tài)研究 4
1.3  硒形態(tài)解析方法 9
1.3.1  樣品前處理技術(shù)—硒的形態(tài)提取 9
1.3.2  硒形態(tài)的聯(lián)用檢測(cè)器技術(shù) 11
1.3.3  硒形態(tài)的聯(lián)用分離技術(shù) 13
1.3.4  分子質(zhì)譜在硒形態(tài)結(jié)構(gòu)鑒定方面的研究 19
1.4  硒的營(yíng)養(yǎng)與生理功能 20
1.4.1  抗氧化作用 20
1.4.2  免疫作用 21
1.4.3  防癌抗癌作用 21
1.4.4  與重金屬拮抗作用 21
1.4.5  預(yù)防心腦血管疾病 22
1.4.6  預(yù)防糖尿病 22
1.5  富硒產(chǎn)品的現(xiàn)狀與開(kāi)發(fā)前景 22
參考文獻(xiàn) 23
第2章  富硒水稻的生物強(qiáng)化與大米硒組學(xué)分析 29
2.1  不同產(chǎn)區(qū)大米硒水平分析 30
2.1.1  檢測(cè)方法的回收率、檢出限和準(zhǔn)確性 31
2.1.2  全國(guó)水稻產(chǎn)區(qū)大米硒含量分析 31
2.1.3  大米產(chǎn)區(qū)居民硒的膳食營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià) 32
2.1.4  全國(guó)部分水稻產(chǎn)區(qū)不同品種大米硒的含量分析 33
2.2  外源硒在水稻中的分布規(guī)律及對(duì)大米品質(zhì)的影響 35
2.2.1  外源硒對(duì)水稻籽粒吸收硒的影響 35
2.2.2  硒在水稻籽粒中的積累與分布 36
2.2.3  外源硒對(duì)水稻產(chǎn)量和籽粒品質(zhì)的影響 36
2.3  富硒大米中硒化合物的金屬組學(xué)分析 37
2.3.1  硒形態(tài)提取方法的篩選 37
2.3.2  IP-RP-HPLC聯(lián)用ICPMS的色譜條件優(yōu)化 38
2.3.3  SeOMet的合成與鑒定 42
2.3.4  RP-HPLC-ICPMS定量分析方法的質(zhì)量控制 43
2.3.5  SAX-HPLC聯(lián)用ICPMS的色譜條件優(yōu)化 45
2.3.6  富硒大米與普通大米中硒的化合物鑒定 46
2.3.7  硒在水稻葉面向籽粒中吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝的可能途徑 49
2.4  富硒大米含硒蛋白提取方法的優(yōu)化 50
2.4.1  硒在富硒大米中的分布 52
2.4.2  等電點(diǎn)沉淀蛋白的pH值篩選 53
2.4.3  富硒大米含硒蛋白提取工藝單因素實(shí)驗(yàn) 54
2.4.4  富硒大米含硒蛋白提取工藝正交實(shí)驗(yàn) 57
2.5  富硒大米含硒蛋白的鑒定及體外生物有效性 58
2.5.1  富硒大米含硒蛋白體外生物有效性 61
2.5.2  富硒大米中含硒蛋白的分布 63
2.5.3  富硒大米四類(lèi)蛋白質(zhì)中含硒蛋白的分子量 64
2.6  含硒蛋白營(yíng)養(yǎng)復(fù)配研究 69
2.6.1  富硒米糠蛋白質(zhì)與硒含量 70
2.6.2  米糠含硒蛋白的提取 71
2.6.3  復(fù)配蛋白硒含量及蛋白質(zhì)純度 72
2.6.4  復(fù)配蛋白氨基酸組成 73
2.6.5  復(fù)配蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià) 74
2.7  小結(jié) 75
參考文獻(xiàn) 76
第3章  富硒大米含硒蛋白酶解物的免疫調(diào)節(jié)功能 79
3.1  酶解方法的優(yōu)化 79
3.1.1  酶的選擇 80
3.1.2  酶解單因素選擇 81
3.1.3  酶解正交試驗(yàn) 86
3.1.4  最佳條件酶解產(chǎn)物還原能力 88
3.2  含硒蛋白酶解液中痕量硒的檢測(cè)方法 89
3.2.1  樣品前處理 89
3.2.2  硒測(cè)定 91
3.2.3  質(zhì)譜干擾的消除 91
3.2.4  標(biāo)準(zhǔn)曲線與相關(guān)系數(shù) 92
3.2.5  方法的檢出限與準(zhǔn)確度 92
3.2.6  方法的加標(biāo)回收率和精密度 93
3.2.7  直接進(jìn)樣ICPMS法的應(yīng)用 93
3.3  含硒蛋白酶解液的抗氧化活性與免疫活性的相關(guān)性 96
3.3.1  抗氧化活性 96
3.3.2  免疫活性 100
3.3.3  硒含量和體外細(xì)胞抗氧化活性、免疫活性的關(guān)系 102
3.3.4  酶解物體外細(xì)胞抗氧化活性和免疫活性的關(guān)系 104
3.4  免疫活性硒肽的分離純化方法 104
3.4.1  不同酶解產(chǎn)物的水解度和硒含量差別 105
3.4.2  免疫活性篩選細(xì)胞模型的建立 106
3.4.3  基于免疫活性對(duì)蛋白酶的篩選 108
3.4.4  含硒肽的凝膠色譜分離純化 111
3.5  免疫活性硒肽的結(jié)構(gòu)鑒定 113
3.5.1  不同組分硒肽的體外免疫活性研究 113
3.5.2  硒肽的一級(jí)結(jié)構(gòu)鑒定 115
3.5.3  高置信度硒肽質(zhì)譜圖分析 118
3.6  小結(jié) 119
參考文獻(xiàn) 120
第4章  大米硒肽緩解鉛損傷作用及其調(diào)控機(jī)制 123
4.1  鉛損傷模型的建立 123
4.1.1  細(xì)胞株型與鉛濃度選擇 123
4.1.2  作用時(shí)間及時(shí)間點(diǎn)選擇 124
4.2  大米硒肽對(duì)鉛損傷細(xì)胞的影響 125
4.2.1  硒肽對(duì)鉛損傷細(xì)胞活力的影響 125
4.2.2  硒肽對(duì)鉛損傷細(xì)胞氧化應(yīng)激水平的影響 126
4.2.3  硒肽對(duì)鉛損傷細(xì)胞膜的影響 128
4.2.4  硒肽對(duì)鉛損傷細(xì)胞抗氧化防御能力的影響 130
4.3  大米硒肽緩解鉛損傷機(jī)制 132
4.3.1  硒肽對(duì)鉛損傷細(xì)胞凋亡形態(tài)的影響 133
4.3.2  硒肽對(duì)鉛損傷細(xì)胞MMP的影響 134
4.3.3  硒肽對(duì)鉛損傷細(xì)胞Caspases活性的影響 135
4.3.4  硒肽對(duì)鉛損傷細(xì)胞Bax、Bcl-2、Cyt C蛋白質(zhì)表達(dá)的影響 136
4.4  硒肽TSeMMM和SeMDPGQQ對(duì)神經(jīng)細(xì)胞氧化毒性的保護(hù)作用 137
4.4.1  硒肽對(duì)Pb2 誘導(dǎo)HT22細(xì)胞氧化毒性的保護(hù)作用 138
4.4.2  TSeMMM和SeMDPGQQ對(duì)Pb2 損傷大鼠胚胎原代皮層神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組的影響 146
4.5  硒肽TSeMMM和SeMDPGQQ對(duì)鉛致毒斑馬魚(yú)的影響 154
4.5.1  Pb2 濃度及培養(yǎng)時(shí)間對(duì)斑馬魚(yú)幼魚(yú)的影響 154
4.5.2  硒肽濃度對(duì)Pb2 誘導(dǎo)斑馬魚(yú)運(yùn)動(dòng)軌跡的影響 155
4.5.3  硒肽對(duì)Pb2 誘導(dǎo)斑馬魚(yú)體內(nèi)Se、Pb2 含量的影響 156
4.5.4  硒肽對(duì)Pb2 誘導(dǎo)斑馬魚(yú)Nrf2-ARE信號(hào)通路的影響 157
4.5.5  硒肽對(duì)斑馬魚(yú)幼魚(yú)體內(nèi)Atp6v0e1與miR-107-3p基因表達(dá)的影響 159
4.6  小結(jié) 160
參考文獻(xiàn) 161
第5章  大米硒肽的活性保護(hù)與生物活性功能調(diào)控 163
5.1  納米顆粒包埋作用研究進(jìn)展 163
5.2  溶菌酶/黃原膠納米顆粒的制備與表征 164
5.2.1  pH對(duì)Ly/XG復(fù)合物溶液濁度的影響 164
5.2.2  不同處理方式對(duì)納米顆粒粒徑的影響 165
5.2.3  納米顆粒制備條件的優(yōu)化結(jié)果 166
5.2.4  微觀形貌表征 168
5.2.5  納米顆粒的元素組成 168
5.2.6  熱處理對(duì)納米顆粒特征官能團(tuán)的影響 169
5.2.7  熱處理對(duì)蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的影響 170
5.2.8  熱處理對(duì)蛋白質(zhì)內(nèi)源熒光和表面疏水性的影響 171
5.3  玉米醇溶蛋白/阿拉伯膠納米顆粒的制備與表征 172
5.3.1  樣品溶液的制備 172
5.3.2  納米顆粒制備條件的優(yōu)化 173
5.3.3  不同濃度下zein/GA的粒徑和分散指數(shù) 173
5.4  不同納米顆粒對(duì)大米硒肽TSeMMM和SeMDPGQQ的包埋作用 174
5.4.1  溶菌酶/黃原膠納米顆粒對(duì)大米硒肽TSeMMM和SeMDPGQQ的包埋作用 174
5.4.2  玉米醇溶蛋白/阿拉伯膠納米顆粒對(duì)大米硒肽TSeMMM的包埋作用 181
5.5  包埋作用對(duì)硒肽吸收特性及其免疫調(diào)節(jié)作用的影響 186
5.5.1  溶菌酶/黃原膠納米顆粒對(duì)硒肽的體外釋放和細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)研究 186
5.5.2  zein@T/GA納米顆粒的體內(nèi)體外釋放效果及體內(nèi)生物利用度研究 194
5.5.3  zein@T/GA納米顆粒對(duì)免疫低下小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用 199
5.6  小結(jié) 205
參考文獻(xiàn) 207