植物生理生化實驗原理和技術(shù)（面向21世紀(jì)課程教材）

第一篇 植物生理生化實驗原理
第一章 植物生理生化實驗技術(shù)的一般原理
1.1 植物材料的種類
1.2 植物材料的采取
1.3 分析樣品的前處理和保存
1.4 待測組分的提取、分離和純化技術(shù)
1.5 樣品中待測組分的測定
1.6 實驗結(jié)果的數(shù)據(jù)處理與分析
第二章 離心技術(shù)
2.1 基本原理
2.2 離心機的類型及主要構(gòu)造
2.3 常用離心技術(shù)
2.4 分析性超速離心技術(shù)的應(yīng)用
第三章 層析技術(shù)
3.1 層析原理
3.2 分配層析
3.3 吸附層析
3.4 凝膠層析
3.5 離子交換層析
3.6 親和層析
3.7 氣相色譜
3.8 高壓液相色譜
3.9 毛細(xì)管電泳色譜
3.10 層析技術(shù)的應(yīng)用實例
第四章 電泳技術(shù)
4.1 電泳基本原理
4.2 影響遷移率的主要因素
4.3 凝膠電泳
4.4 電泳的應(yīng)用
第五章 紅外線CO2 氣體分析技術(shù)
5.1 紅外線CO2 氣體分析儀的工作原理
5.2 紅外線C0 2 氣體分析儀的類型
5.3 紅外線CO2 氣體分析技術(shù)的應(yīng)用
第六章 光學(xué)分析技術(shù)
6.1 紫外光一可見光分光光度法
6.2 原子吸收分光光度法
6.3 火焰分光光度法
6.4 熒光分光光度法
6.5 旋光分析法
第七章 氣體測壓技術(shù)
7.1 氣體測壓技術(shù)的類型及基本原理
7.2 氣體測壓技術(shù)的應(yīng)用
第八章 電化學(xué)分析技術(shù)
8.1 電化學(xué)分析技術(shù)的類型及基本原理
8.2 電化學(xué)分析技術(shù)的應(yīng)用
8.3 DDs_1 2 A型數(shù)字式電導(dǎo)率儀的
基本原理及使用方法
第九章 免疫化學(xué)技術(shù)——酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)
9.1 ELISA的原理
9.2 設(shè)計和合成特定的免疫原
9.3 抗體的制備
9.4 標(biāo)記抗原的制備
9.5 ELISA測定程序的設(shè)計
9.6 總結(jié)
第十章 Southernblotting和PcR反應(yīng)原理與技術(shù)
10.1 Southern雜交
10.2 PCR反應(yīng)
第二篇 植物生理生化實驗技術(shù)
實驗1 植物組織中自由水和束縛水含量的測定
實驗2 植物組織水勢的測定
I 小液流法
Ⅱ 折光儀法
Ⅲ 壓力室法
實驗3 植物細(xì)胞滲透勢的測定(質(zhì)壁分離法)
實驗4 鉀離子對氣孔開度的影響
實驗5 植物傷流液中糖和氨基酸的鑒定
實驗6 根系活力的測定(TTC法)
實驗7 植物組織中金屬元素的測定(原子吸收分光光度法)
實驗8 植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量的測定
實驗9 植物體內(nèi)硝酸還原酶活力的測定
I 離體法
Ⅱ 活體法
實驗10 用真空滲入法測定環(huán)境因子對光合作用的影響
實驗11 葉綠體色素的提取、分離和理化性質(zhì)
I 提取與分離
Ⅱ 理化性質(zhì)
實驗12 葉綠素含量的測定
實驗13 希爾反應(yīng)的觀察
實驗14 核酮糖一15 一二磷酸羧化酶活性的測定
I 分光光度法
Ⅱ 同位素法
實驗15 乙醇酸氧化酶活性的測定
實驗16 紅外線CO2 氣體分析儀法測定植物光合速率與呼吸速率
I 密閉系統(tǒng)斜率法
Ⅱ 密閉系統(tǒng)落差法
實驗17 TPs一1 便攜式光合作用系統(tǒng)測定光合速率、呼吸速率和蒸騰速率
實驗18 氧電極法測定光合速率和呼吸速率
實驗19 葉綠體光誘導(dǎo)熒光強度的測定
實驗20 葉綠體中甘油醛一3 一磷酸脫氫酶活性的測定
實驗21 微量定容測壓法測定種子的呼吸速率
實驗22 小籃子法(廣口瓶法)測定植物的呼吸速率
實驗23 愈創(chuàng)木酚法測定過氧化物酶活性
實驗24 過氧化氫酶活性測定
I 紫外吸收法
Ⅱ 高錳酸鉀滴定法
實驗25 氮藍四唑(NBT)法測定超氧物歧化酶活力
實驗26 淀粉酶活性的測定
實驗27 脲酶K值的測定
實驗28 植物過氧化物酶同工酶測定(圓盤式凝膠電泳法)
實驗29 蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的測定(SDS一聚丙烯酰胺凝膠電泳法)
實驗30 植物組織中蛋白質(zhì)含量的測定
I 雙縮脲法
Ⅱ Folin一酚試劑法
Ⅲ 考馬斯亮藍G一2 50 法(Bradford法)
Ⅳ 紫外吸收法
實驗31 植物組織中總氮含量的測定——微量凱氏定氮法
實驗32 植物組織中游離氨基酸總量的測定——茚三酮試劑顯色法
實驗33 植物組織中糖含量的測定
I 蒽酮比色法測定可溶性糖
Ⅱ 35 一二硝基水楊酸測定還原糖
Ⅲ 苯酚法測定可溶性糖
Ⅳ 斐林試劑比色法測定還原糖
實驗34 谷物淀粉含量的測定(旋光法)
方法I
方法Ⅱ
實驗35 谷物種子蛋白質(zhì)組分的分析
實驗36 植物種子生命力的快速測定
I TTC法
Ⅱ 染料染色法
Ⅲ 碘化鉀反應(yīng)法
Ⅳ 熒光法
實驗37 花粉活力的測定
I 碘一碘化鉀(I—KI)染色測定法
Ⅱ 過氧化物酶測定法
Ⅲ 氯化三苯基四氮唑法(TTC法)
實驗38 植物組織中纖維素含量的測定
實驗39 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的測定
實驗4 植物組織中DNA的提取與測定
實驗41 DNA的瓊脂糖凝膠電泳
實驗42 RNA的聚丙烯酰胺凝膠電泳
實驗43 PCR反應(yīng)
實驗44 Sotlthemblotting
實驗45 植物組織ATP酶活性測定
實驗46 種子粗脂肪含量的測定
實驗47 氣相色譜法測定植物樣品膜脂中脂肪酸的含量
實驗48 植物種子中主要不飽和脂肪酸的分離(反相紙層析法)
實驗49 油菜籽中硫代葡萄糖苷總量的測定
I 內(nèi)源酶法
Ⅱ 葡萄糖試紙法(硫苷總量的快速測定)
實驗50 氣相色譜法測定乙烯含量
實驗51 酶聯(lián)免疫吸附檢測法(ELISA)測定植物激素含量
實驗52 植物體內(nèi)脫落酸、赤霉素的分離和測定
實驗53 赤霉素對a一淀粉酶的誘導(dǎo)形成
實驗54 植物激素對愈傷組織的形成和分化的影響
實驗55 類似生長素對種子萌發(fā)的影響
實驗56 植物春化和光周期現(xiàn)象的觀察
I 植物春化現(xiàn)象的觀察
Ⅱ 植物光周期現(xiàn)象的觀察
實驗57 抗壞血酸(維生素c)的測定
I 滴定法
Ⅱ 比色法
實驗58 谷類作物種子中賴氨酸含量的測定
I 茚三酮顯色法
Ⅱ 染料結(jié)合法(DBL)
實驗59 脯氨酸含量的測定
實驗60 植物組織中丙二醛含量的測定
實驗61 植物抗逆性的鑒定(電導(dǎo)儀法)
實驗62 綜合實驗1 一大豆為材料
實驗63 綜合實驗2 一甜葉菊葉片為材料
附錄
附錄1 硫酸銨飽和度常用表
附錄2 實驗中常用酸堿的相對密度和濃度的關(guān)系
附錄3 常用固態(tài)酸、堿、鹽的摩爾濃度配制參考表
附錄4 常用酸堿指示劑
附錄5 常用緩沖溶液的配制
主要參考文獻
附錄6 植物組織培養(yǎng)常用培養(yǎng)基
附錄7 常用計量單位
附錄8 常見的植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)及其主要性質(zhì)
附錄9 植物激素與生長調(diào)節(jié)劑在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用