基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實驗教程

1 細(xì)胞學(xué)技術(shù)
1.1 顯微鏡
1.1.1 光學(xué)顯微鏡
1.1.1.1 普通光學(xué)顯微鏡
1.1.1.2 相差顯微鏡
1.1.1.3 暗視野顯微鏡
1.1.1.4 熒光顯微鏡
1.1.1.5 倒置顯微鏡
1.1.1.6 體視顯微鏡
1.1.1.7 萬能研究用顯微鏡
1.1.2 電子顯微鏡
1.1.2.1 電鏡的基本原理
1.1.2.2 電鏡的基本構(gòu)造
1.1.2.3 透射電鏡的標(biāo)本制備及觀察
1.1.2.4 掃描電鏡的標(biāo)本制備及觀察
1.1.2.5 其他電鏡
1.1.2.6 電鏡的制備技術(shù)
1.1.2.7 電子探針顯微鏡分析
1.1.3 顯微鏡的應(yīng)用
1.1.3.1 細(xì)胞顯微攝影
1.1.3.2 血液涂片及顯微測量
1.1.3.3 細(xì)胞顯微注射
1.1.3.4 放射自顯影術(shù)
1.2 細(xì)胞結(jié)構(gòu)觀察和成分分析
1.2.1 細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)
1.2.1.1 光學(xué)顯微鏡下的細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)
1.2.1.2 細(xì)胞器的顯微和超微結(jié)構(gòu)
1.2.1.3 細(xì)胞中微絲的染色及觀察
1.2.1.4 細(xì)胞組分的分級分離
1.2.1.5 細(xì)胞群體中各周期時相百分比的測定
1.2.2 細(xì)胞化學(xué)分析
1.2.2.1 細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)及核酸成分的測定
1.2.2.2 細(xì)胞內(nèi)酸性磷酸酶和過氧化物酶的測定
1.2.3 細(xì)胞的生命活動
1.2.3.1 觀察細(xì)胞的生理活動
1.2.3.2 人類ABO血型的測定
1.2.3.3 細(xì)胞的活體染色
1.2.3.4 同種和異種細(xì)胞融合
1.2.3.5 動物細(xì)胞的原代培養(yǎng)和細(xì)胞計數(shù)
1.2.3.6 動物和植物細(xì)胞的有絲分裂
1.2.3.7 動物細(xì)胞的減數(shù)分裂
1.2.3.8 TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡
參考文獻(xiàn)
2 免疫學(xué)檢測技術(shù)
2.1 細(xì)胞免疫檢測技術(shù)
2.1.1 人外周血單個核細(xì)胞分離——Ficoll分層離心法
2.1.2 T、B淋巴細(xì)胞的分離——尼龍毛柱法
2.1.3 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞分離
2.1.4 T淋巴細(xì)胞亞群檢測——微量細(xì)胞毒法
2.1.5 E玫瑰花環(huán)試驗
2.1.6 B細(xì)胞膜免疫球蛋白檢測
2.1.7 脾細(xì)胞介導(dǎo)的SRBC溶血分光光度計定量測定法（QHs）
2.1.8 小鼠骨髓細(xì)胞自發(fā)增殖活性測定
2.1.9 小鼠胸腺細(xì)胞自發(fā)增殖活性測定
2.1.10 小鼠脾細(xì)胞自發(fā)增殖活性測定
2.1.11 T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗
2.1.11.1 3H-TdR摻入法
2.1.11.2 MTT比色法
2.1.11.3 微量全血法
2.1.12 B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗
2.1.13 巨噬細(xì)胞吞噬功能測定
2.1.13.1 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞
2.1.13.2 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬中性紅測定
2.1.14 細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒技術(shù)
2.1.14.1 抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒試驗
2.1.14.2 NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗
2.1.14.3 補體依賴性細(xì)胞毒實——小鼠脾及胸腺T細(xì)胞百分率測定
2.1.14.4 小鼠細(xì)胞毒T細(xì)胞（cTL）活性測定
2.1.15 LAK殺傷活性檢測
2.2 細(xì)胞因子檢測技術(shù)
2.2.1 白細(xì)胞介素1的誘生及檢測
2.2.2 白細(xì)胞介素2檢測
2.2.2.1 依賴細(xì)胞株增殖測定法
2.2.2.2 鼠脾T淋巴細(xì)胞增殖分析法
2.2.3 腫瘤壞死因子測定
2.2.4 集落刺激因子檢測
2.2.5 干擾素檢測
2.2.6 趨化因子檢測
2.2.7 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子檢測
2.2.8 轉(zhuǎn)化生長因子B檢測
2.3 抗體制備技術(shù)
2.3.1 免疫血清制備
2.3.2 動物的選擇
2.3.3 免疫原
2.3.4 佐劑
2.3.5 免疫途徑
2.3.6 免疫血清效價的測定
2.3.7 采血及分離血清
2.3.8 免疫血清的保存
2.3.9 兔抗人血清白蛋白多克隆抗體的制備
2.3.10 抗體的純化
2.3.10.1 硫酸銨鹽析法
2.3.10.2 DEAE-纖維素層析法
2.3.11 單克隆抗體制備
2.3.12 基因工程抗體
2.4 抗原抗體檢測技術(shù)
2.4.1 直接凝集
2.4.1.1 玻片凝集——ABO血型鑒定
2.4.1.2 試管凝集
2.4.2 間接凝集——抗鏈球菌溶血素0（ASO）抗體的檢測
2.4.3 協(xié)同凝集
2.4.4 雙向免疫擴散
2.4.5 單向免疫擴散
2.4.6 對流免疫電泳
2.4.7 火箭電泳
2.4.8 免疫電泳
2.4.9 免疫印記檢測嗜酸性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞（Eol-1）bcl-2蛋白的表達(dá)
2.4.10 免疫沉淀法
2.4.11 補體依賴細(xì)胞毒試驗
2.4.12 溶血反應(yīng)——血清總補體含量的測定（cH50）
2.5 免疫標(biāo)記技術(shù)
2.5.1 免疫熒光技術(shù)
2.5.1.1 間接法——T細(xì)胞亞群檢測
2.5.2 免疫酶技術(shù)
2.5.2.1 夾心法ELISA——檢測sIL-2R
2.5.2.2 ELIsA間接法——單抗隆抗體篩選
2.5.2.3 免疫酶染色——IL-2受體陽性細(xì)胞檢測
2.6 放射免疫分析
2.6.1 放射性同位素標(biāo)記抗原
2.6.2 放射免疫分析技術(shù)
2.6.3 免疫放射測定
2.7 免疫組織化學(xué)技術(shù)
2.7.1 常用的免疫組化技術(shù)
2.7.1.1 免疫酶組織化學(xué)技術(shù)
2.7.1.2 膠質(zhì)細(xì)胞酸性蛋白（GFAP）的免疫組化染色分析
2.7.2 免疫熒光組化技術(shù)
2.7.2.1 直接法
2.7.2.2 間接法
2.7.2.3 補體法
2.7.2.4 雙重免疫熒光染色法
2.7.3 親合組織化學(xué)技術(shù)
2.7.3.1 生物素一抗生物素免疫細(xì)胞組織化學(xué)染色技術(shù)
2.7.3.2 葡萄球菌A蛋白（SPA）法
2.7.3.3 凝集素法
2.7.4 免疫金銀細(xì)胞組織化學(xué)技術(shù)
2.7.4.1 免疫金法（IGs）
2.7.4.2 免疫銀法（IGSS）
2.7.5 免疫膠體鐵細(xì)胞組織化學(xué)技術(shù)
2.8 超敏反應(yīng)檢測技術(shù)
2.8.1 血清總IgE測定
2.8.1.1 反向間接血凝法測定人血清總IgE
2.8.1.2 EGIsA雙抗體夾心法測定人血清總IgE
2.8.2 特異性IgE的測定
2.8.3 過敏性皮膚試驗
2.8.4 免疫復(fù)合物測定
2.8.4.1 聚乙二醇沉淀試驗
2.8.4.2 I標(biāo)記的clq結(jié)合試驗
2.8.5 Ⅳ型超敏反應(yīng)皮膚試驗
2.8.5.1 結(jié)核菌素試驗
2.8.5.2 鏈激酶一鏈導(dǎo)酶（sK-sD）皮膚試驗
參考文獻(xiàn)
3 醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)技術(shù)
3.1 細(xì)胞遺傳學(xué)實驗技術(shù)
3.1.1 人的x染色質(zhì)和鼓槌
3.1.2 人類的染色體及核仁形成區(qū)
3.1.3 人類的染色體核型
3.1.4 小白鼠骨髓細(xì)胞的染色體
3.1.5 人類外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)及染色體標(biāo)本制備技術(shù)
3.1.6 人類染色體G顯帶技術(shù)及染色體G顯帶的鑒別
3.1.7 人類染色體c顯帶技術(shù)
3.1.8 人類高分辨顯帶染色體標(biāo)的制備技術(shù)
3.1.9 實體瘤細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備技術(shù)
3.1.10 羊水細(xì)胞的培養(yǎng)及其染色體標(biāo)本的制備技術(shù)
3.1.11 絨毛細(xì)胞的培養(yǎng)及其染色體標(biāo)本的制備技術(shù)
3.1.12 x，Y性染色質(zhì)的檢查
3.1.13 x染色體脆性部位顯示法
3.2 遺傳毒理學(xué)實驗技術(shù)
3.2.1 姐妹染色單體互換試驗
3.2.1.1 小鼠骨髓細(xì)胞姐妹染色單體互換試驗
3.2.1.2 人外周血淋巴細(xì)胞姐妹染色單體互換試驗
3.2.2 染色體畸變試驗
3.2.3 小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗
3.2.4 人外周血淋巴細(xì)胞微核試驗
3.2.5 精子畸形試驗
3.2.6 非程序DNA合成
參考文獻(xiàn)
4 分子生物學(xué)技術(shù)
4.1 基因診斷技術(shù)
4.1.1 慢性粒細(xì)胞白血病的基因易位與基因診斷
4.1.1.1 基因組DNA的提取
4.1.1.2 DNA樣品的純化、定量和濃縮
4.1.1.3 人染色體DNA的限制性酶切
4.1.1.4 瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段
4.1.1.5 Southern印記轉(zhuǎn)移DNA片段
4.1.1.6 分子雜交和放射自顯影
4.1.2 用PcR擴增法檢測性別
4.1.2.1 微量外周血標(biāo)本制備模板DNA
4.1.2.2 PCR檢測性別
4.1.3 PCR-SSCF，診斷法
4.1.4 基因診斷的實驗設(shè)計
4.2 免疫分子生物學(xué)檢測技術(shù)
4.2.1 免疫PCR檢測rhIL3
4.2.2 TNFamRNA表達(dá)的測定
4.3 HPV基因的克隆及初步鑒定
4.3.1 提取組織DNA
4.3.2 核酸定量
4.3.3 PCR擴增
4.3.4 PCR產(chǎn)物回收
4.3.5 連接反應(yīng)
4.3.6 轉(zhuǎn)化
4.3.7 陽性重組體篩選及初步鑒定
參考文獻(xiàn)
5 細(xì)菌分析技術(shù)
5.1 細(xì)菌染色技術(shù)
5.1.1 細(xì)菌的革蘭染色法
5.1.2 細(xì)菌莢膜染色法（Hiss法）
5.1.3 細(xì)菌鞭毛染色法
5.1.4 細(xì)菌芽胞染色法
5.1.5 抗酸染色法
5.1.6 奈瑟染色法
5.2 細(xì)菌的分離培養(yǎng)
5.2.1 常用培養(yǎng)基的制備
5.3 細(xì)菌培養(yǎng)技術(shù)和生長現(xiàn)象示教
5.3.1 平板劃線分離培養(yǎng)法
5.3.2 純種細(xì)菌移種技術(shù)
5.3.2.1 斜面培養(yǎng)基移種技術(shù)
5.3.2.2 液體培養(yǎng)基移種技術(shù)
5.3.2.3 半固體培養(yǎng)基移種
6 其他原核微生物的微生物學(xué)檢查
7 真菌學(xué)
8 病毒學(xué)
9 人體寄生蟲學(xué)實驗技術(shù)
10 疫苗研究技術(shù)